Jornadas de actualización

Citometría se Flujo:
“Fundamentos y aplicaciones en la investigación básica y la clínica”

Año lectivo: 2024
Carga horaria: 15 horas.
Período: Fecha de inicio 27/05/2024 - Fecha de finalización 31/05/2024
Días y horarios: Lunes a viernes de 9 a 12 hs (clases teóricas).
Sede de dictado: Facultad de Ciencias Médicas.
Opción pedagógica y didáctica: clases teóricas.

Cuerpo Directivo a cargo

Herlax, Vanesa

Directora
Prof. adjunta, Cátedra de Bioquímica y Biología Molecular. Inv. Independiente de CONICET.

Arnal, Nathalie

Coordinadora
Ayudante Diplomada de la Cátedra de Genética de la FCNyM - UNLP

Rosu, Silvana

Coordinadora
Jefe de trabajos prácticos Cátedra de Bioquímica y Biología Molecular de la Facultad de Ciencias Médicas.

Rodenak Kladniew, Boris

Docente a cargo
Inv. Asistente-INIBIOLP-CONICET.
Scaglia

Scaglia, Natalia

Docente a cargo
Inv. Adjunto-INIBIOLP-CONICET.

Cattaneo, Elizabeth Renee

Docente a cargo
Docente Investigadora-UNLP.

Tau, Julia

Secretaria
Personal de Apoyo de CONICET-INIBIOLP. Profesional a cargo del citómetro de flujo del INIBIOLP.


Fundamentación

El constante desarrollo y evolución de las herramientas disponibles hoy en día para la investigación básica, aplicada y el diagnóstico médico requiere de la actualización permanente y capacitación continua de los profesionales involucrados. La citometría de flujo es una técnica actual, altamente sensible y que presenta numerosas aplicaciones en campos como la inmunología, hematología, oncología, anatomía patológica y biología celular. Esta tecnología es capaz de proporcionar información cuantitativa sobre cada célula permitiendo la identificación de subpoblaciones celulares diferentes dentro de una misma muestra, incluso cuando se encuentran en una proporción muy pequeña. De esta manera, se presenta como una técnica ventajosa frente a otros métodos bioquímicos de análisis celular, en los que se obtiene un resultado promedio para toda una muestra.
El hecho de poder recolectar información de millones de células a la vez facilita el análisis de múltiples parámetros pudiendo obtener datos estadísticamente significativos en un periodo de tiempo corto. Por lo tanto, consideramos importante presentar una capacitación y actualización de las utilidades de la citometría de flujo en la biomedicina, y así ofrecer una formación integral a estudiantes que participan de programas de doctorado en el área de las ciencias biológicas y familiarizar a los profesionales con el manejo de los equipos y las diferentes aplicaciones tanto en investigación básica como clínica.

El instituto de investigaciones bioquímicas de la plata dispone, dentro de su plataforma de servicios, de una unidad de citometría de flujo que ofrece soporte a la comunidad científica, académica y cualquier institución que lo requiera. Es en este sentido que proponemos divulgar las aplicaciones que se pueden realizar mediante esta técnica en la población científica local y así dar a conocer nuestro equipo.

Objetivos

Los objetivos que proponemos que alcancen las y los asistentes al curso son:

1- Conocer el funcionamiento general del equipo de citometría de flujo.
2- Conocer el fundamento de la técnica para poder aplicarlo en los distintos campos de la biomedicina.
3- Aprender sobre la preparación de muestras de distinto origen (células sanguíneas, células de cultivos, tejido).
4- Aprender a analizar e interpretar los resultados obtenidos utilizando diferentes softwares. (Flowjo y software accuri c6 plus de bd).
5- Informarse de las aplicaciones actuales de la técnica tanto en investigación básica como aplicada, específicamente en el campo de las ciencias de la salud y aplicaciones clínicas.

Destinatarios/as y perfil del alumno/a

- Dirigido a egresadas/os de bioquímica, biotecnología y biología molecular, ciencias naturales, ciencias médicas y carreras afines.
- Presentar cv y una nota breve sobre los motivos de interés en la realización del curso.

Contenidos

1. Introducción a la citometría de flujo: fundamentos básicos de la citometría de flujo y de la separación celular, parámetros medidos por citometría, descripción de los componentes básicos del citómetro de flujo.
2. Fluorocromos y teoría de la compensación: concepto de fluorescencia y marcadores fluorescentes, diseño de paneles multicolor, teoría de la compensación, selección de fluorocromos.
3. Diseño experimental y adquisición de la muestra: controles en citometría, preparación de la muestra para citometría de flujo, configuración del equipo.
4. Análisis de datos: criterios de análisis de datos. Definición de regiones y gates, gráfico y estadística de datos. Softwares.
5. Aplicaciones de la citometría en investigación biomédica: detección y cuantificación de metabolitos o antígenos para el análisis de procesos celulares, incluyendo viabilidad, proliferación, progresión en el ciclo celular, generación de especies reactivas del oxígeno (ros), señalización por calcio y expresión ectópica de proteínas fluorescentes.
6. Aplicaciones de la citometría en la clínica: tipificación de poblaciones celulares en pacientes trasplantados de intestino, aplicación en oncohematología, caracterización de pólipos intestinales.

Metodología de trabajo

El estudiantado tendrá clases presenciales teóricas durante las mañanas de la semana del 27 al 31 de mayo de 2024. Las clases serán dictadas por especialistas en forma presencial utilizando powerpoint, videos, y otras herramientas. Se compartirá mediante drive con estudiantes el acceso a estas presentaciones y bibliografía recomendada por parte del equipo docente.
Al finalizar las clases los y las estudiantes contarán con 15 a 30 minutos para discutir o consultar todo aquello que consideren necesario para poder adquirir los contenidos propuestos.
Por las tardes, realizarán experimentos en el citómetro del INIBIOLP.
El objetivo de las prácticas es que los estudiantes apliquen los conocimientos teóricos incorporados en las clases.
Las prácticas experimentales se realizarán en grupos de 10 estudiantes, por lo tanto, los días lunes, martes y miércoles se trabajará en simultáneo con dos grupos; mientras un grupo hace el experimento el otro grupo analizará resultados de experimentos realizados previamente por los organizadores del curso. Una vez que ambos grupos realicen su propio experimento (anexo I, II y III) analizarán sus propios resultados con un especialista en análisis de datos de la empresa BD, que les dará acceso a licencias de flowjo educativas a los participantes de manera temporaria durante las actividades. Finalizados estos cálculos se discutirán entre todo el grupo los resultados obtenidos y analizarán las distintas formas de interpretar y presentar los resultados de citometría de flujo.
Por último, con la evaluación pretendemos que el estudiantado sea capaz de armar sus propios protocolos dependiendo de los intereses de cada uno.
Si bien se espera que el estudiantado adquiera conocimientos básicos en el manejo como en la interpretación de resultados focalizados en la citometría de flujo, consideramos además que la interrelación entre estudiantes del ámbito profesional y de investigación básica, acrecentará el vínculo entre ellos, posibilitando así un análisis interdisciplinario de los temas aplicados con posibles colaboraciones científico-asistencial.
La modalidad presencial, con encuentros diarios de 7 hs (teórico-práctica) permitirá un seguimiento del estudiantado, como también de sus participaciones e intereses planteados a lo largo de las charlas y de los prácticos, las que serán tenidas en cuenta por los y las profesores.
Este tiempo de trabajo también posibilitará la interacción entre estudiantes.
Los materiales didácticos y recursos educativos por utilizar en la propuesta son: presentación de diapositivas digitalizadas
Soporte tecnológico: pc/notebook; cañón para presentación de diapositivas.

Sistema de evaluación

Se evaluarán los contenidos abordados en las clases teóricas (detallados en los objetivos del curso) mediante un cuestionario de respuestas múltiples online. El estudiantado tendrá una semana para responder el cuestionario que se aprobará con 7/10 ptos.
El estudiantado deberá contar con el 80% de asistencia para poder acceder a la evaluación correspondiente. La recuperación se llevará a cabo con la misma modalidad, 15 días después de la entrega de notas.

Arancel de la actividad de postgrado

● Curso teórico: $ 30.000

Cupos:

● Cupo máximo total: 20
● Cupo mínimo total: 5

Contacto: citometro@med.unlp.edu.ar


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